Sumaries of Research Papers (AEM Horta and his Team)

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II Simp. Inter. de Reprod. Animal, SPRA, Lisboa, 21-24 Nov., pp. 291-301 (1984)

A INJECÇÃO POR VIA INTRAVULVOSUBMUCOSA PERMITE REDUZIR AS DOSES DAS PROSTAGLANDINAS UTILIZADAS NA LUTEOLISE E SINCRONIZAÇÃO DO CICLO ÉSTRICO EM BOVINOS.

Horta, A.E.M., Costa, C.M.S.G., Robalo Silva, J e Rios Vasques, M
Estação Zootécnica Nacional, 2000 Vale de Santarém, Portugal

É revisto o efeito da injecção por via intravulvo-submucosa (IVSM) sobre a dose luteolítica da PGF2 alpha e do cloprostenol. O efeito luteolítico da PGF2 alpha administrada por via IVSM foi testado em vacas com corpo lúteo persistente por Ono et al. (1982). O cloprostenol foi testado por Horta et al. (1984) em vacas e novilhas cíclicas utilizando a mesma via. No primeiro caso, os autores verificaram que doses inferiores a 6 mg de PGF2 alpha injectada por via IVSM conseguem provocar a regressão do corpo amarelo e indução de cios fertéis. No segundo caso, a dose luteolítica do cloprostenol foi reduzida de 500 microgramas (via IM) para 125 microgramas (via IVSM), tendo-se verificado que com esta última dose e via de administração é possivel provocar a luteolise e indução de cios fertéis quer em vacas adultas quer em novilhas.

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III Simp. Inter. de Reprod. Animal, SPRA, Lisboa (1986)

PGF2 alpha e PROSTACICLINA VS RETENÇÃO PLACENTÁRIA NA VACA.

Horta, A.E.M., Chassagne*, M. and Brochart*, M.
Estação Zootécnica Nacional, 2000 Vale de Santarém, Portugal
*Laboratoire d´Éco-Pathologie, INRA-Theix, France

Este trabalho teve o objectivo de detectar eventuais diferenças nas concentrações plasmáticas ao nível periférico do 13,14-dihidro-15-ceto-PGF2 alpha (PGFM) e do 6-ceto-PGF1alfa (PGIM) entre vacas com (RP) e sem (NRP) retenção placentária (parto normal). As colheitas de sangue foram efectuadas aos 5, 30 e 60 minutos pós-parto em 8 vacas RP e 17 vacas NRP.
As concentrações plasmáticas em PGFM foram inferiores nas vacas RP do que nas vacas NRP aos 60 minutos após a expulsão do feto (8156 pg/ml vs 12016 pg/ml; P< 0,05). Entre os 30 e 60 minutos pós-parto houve um aumento significativo dos níveis de PGFM nas vacas do grupo NRP (6225 pg/ml vs 12016 pg/ml; P< 0,01) enquanto nas vacas RP, o nível de PGFM permaneceu constante durante o período estudado. Em relação à PGIM, não se observou qualquer diferença significativa entre RP e NRP, maugrado os valores ligeiramente superiores das primeiras.A relação PGFM/PGIM foi significativamente superior nas vacas do grupo NRP 60 minutos após o parto (15,5 vs 8,8; P< 0,01) relativamente à do grupo RP. Esta relação aumentou significativamente entre 30 e 60 minutos (7,2 vs 15,5; P< 0,05) nas vacas NRP, resultado não esperado nas vacas RP. Não houve correlação significativaentre os níveis de PGFM e PGIM durante os primeiros 60 minutos pós-parto para as vacas do grupo NRP. No entanto, uma tal correlação foi significativamente positiva para as vacas do grupo RP (r=0,75; P< 0,01).
Os resultados sugerem que a síntese de PGF2 alpha entre 30 e 60 minutos pós-parto é significativamente inferior nas vacas com retenção placentária, como o reflecte a concentração de PGFM. Eles sugerem por outro lado, que a síntese de prostaciclina parece manter-se estável durante os primeiros 60 minutos após o parto nas vacas sem retenção dos anexos fetais, mas não nas que fazem retenção placentária onde a concentração em PGIM aumenta ao mesmo tempo que a de PGFM. Propõe-se que um desequilíbrio da síntese da PGF2 alpha e de PGI2 durante os primeiros 60 minutos pós-parto, conduzindo a uma carência de PGF2 alpha e um aumento relativo de PGI2, esteja associado à retenção placentária na vaca.

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International Symposium on the use of Nuclear Techniques in Studies of Animal Production and Health in Different Environments, IAEA-SM-292/5P: 93, Vienna - Austria (1986)

POSTPARTUM ANOESTRUS IN BEEF COWS: A COMPARISON BETWEEN TWO GROUPS OF ANIMALS CALVING AT DIFFERENT TIMES OF THE YEAR.

Robalo Silva, J., Horta, A.E.M., Rios Vasques, M., Leitão, M. and Cláudio, D.

A study was undertaken to determine seasonal variation in ovarian activity in postpartum beef cows of the Alentejano breed.
Observations performed on cows calving in January to March (group A) and August to October (group B) over a two year period, showed a mean interval from parturition to the onset of cyclic ovarian activity of 53,9 ± 28,8 and 92,1 ± 38,9 days for cows from group A that calved in 1984 and 1985, respectively, and 26 ± 10,6 and 30,3 ± 13,6 days for cows from group B that calved in 1984 and 1985, respectively. Cows that calved in late Summer/Autumn resumed postpartum ovarian activity significantly sooner than cows that calved in Winter/early Spring (P< 0,01). Reproductive performance was assessed during the period from mating to pregnancy diagnosis by rectal palpation at 45 to 60 days after service (mating seasons were April/May and November/December for group A e B, respectively). During a 60 days mating periods the percentage of served cows was 91,5% and 87,5% in groups A e B, respectively. The percentage of pregnant cows in group A was 91,8% and 80,0% at 24 and 45-60 days, respectively, and 92,3% and 87,7% at 24 and 45-60 days, respectively, in group B.
It seems that Spring may not be a very convenient season for reproduction in this breed of cattle. This is discussed in relation to the usual system of reproductive management followed for this breed in Portugal.

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V Jornadas Internacionales en Reproducción Animal e I.A. (Ponencias y comunicaciones no incluidas n los tomos I y II), Asociación Española de Especialistas en Reproducción Animal, Inseminación Artificial e Nuevas Tecnologias, Zaragoza - Espanha, pp. 51-69 (1990)

INÍCIO DA ACTIVIDADE OVÁRICA PÓS-PARTO NA VACA ALENTEJANA: INFLUÊNCIA DE ÉPOCAS DE PARIÇÃO E DE ANOS DIFERENTES

A.E.M. Horta, M. Irene Vasques, R.M. Leitão, J. Robalo Silva
Departamento de Fisiologia e Reprodução Animal, Estação Zootécnica Nacional - Instituto Nacional de Investigação Agrária, Vale de Santarém 2000, Portugal

A actividade ovárica pós-parto (PP) da vaca Alentejana em regime de pastoreio extensivo, foi estudada através de análises de progesterona plasmática pelo método de radioimunoanálise (RIA). A duração da aciclia ovárica PP foi comparada entre vacas parindo em duas épocas diferentes (Janeiro-Março e Agosto-Outubro). Diferenças entre vacas primíparas e pluríparas, interrupção temporária do aleitamento (72 horas ao 20º dia PP) e o peso das mães ao parto, foram também considerados relativamente à sua influência sobre o reinício da actividade ovárica. A fertilidade após duas épocas de cobrição natural (Abril-Maio e Novembro Dezembro), foi igualmente estudada. A aciclia ovárica PP foi significativamente superior após a estação de partos de inverno do que após a do verão, quer em vacas pluríparas quer nas primíparas(74 vs 33,1 e 111,1 vs 35,6dias, respectivamente; P< 0,001).As vacas primíparas demoraram significativamente mais tempo para reiniciarem a sua actividade ováricadoque as pluríparas durante a época invernal (P< 0,001). A estação do ano interagiu com a paridade, relativamente à duração da inactividade ovárica pós-parto (P< 0,0001). O peso vivo das vacas na altura do parto foi significativamente inferior durante a estação de inverno, nas primíparas e pluríparas (435,8 vs 577 Kg e 565,8 vs 642,8 Kg, respectivamente; P< 0,001). A interrupção temporária do aleitamento resultou em períodos de anestro PP mais curtos somente durante a época de verão (30,1 vs 39 dias; P< 0,05). O peso vivo ao parto (PVP) e o intervalo entre o parto e o dia 21 de Junho (P-21J), mostraram-se significativamente correlacionados com a duração da inactividade ovárica pós-parto (Y = 162,17 - 0,222 * (PVP) + 0,316 * (P-21J); r²=0,41; P< 0,03). As vacas paridas no inverno mostraram variações significativas na duração do anestro entre anos diferentes, relacionando-se este fenómeno com as condições nutritivas dos animais sob influência pluviométrica. Devido a um anestro pós-parto muito longo, a fertilidade durante a época de primavera foi inferior à do outono durante três dos anos estudados (63,9 vs 76,9%, 57,8 vs 62,9% e 36,5 vs 60,6%, respectivamente em 1984, 1985 e 1986). Os resultados apresentados aqui, mostram que a estação de partos de inverno atrasa o início da actividade ovárica subsequente, nesta raça e nas nossas condições, diminuindo consequentemente a fertilidade. O efeito sazonário parece estar associado a uma diminuição da disponibilidade alimentar durante o inverno. A interrupção temporária do aleitamento encurta o período de aciclia somente durante a época de verão. As vacas primíparas durante a época de inverno, precisam de um período significativamente mais longo para reciclarem a função ovárica do que as pluríparas.
---------------------- *Trabalho realizado com o apoio do Instituto Nacional de InvestigaçãoAgraria (PIDDAC) e a Agência Internacional de Energia Atómica (IAEA, Viena, Austria) sob o contracto de investigação No. 3259/RB. Parte deste trabalho foi originalmente publicado em língua inglesa pela IAEA.

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Anim. Reprod. Sci., 38(4): 279-289 (1995)

LEVELS OF bPSPB THROUGHOUT SINGLE AND TWIN PREGNANCIES AFTER AI OR TRANSFER OF IVM/IVF CATTLE EMBRYOS.

M.I. Vasques1, A.E.M. Horta1, C.C. Marques1, R.G. Sasser2 and P. Humblot3
1Departamento de Reprodução, Estação Zootécnica Nacional, INIA, 2000 Vale de Santarém, Portugal
2University of Idaho, Dpt. Anim. Sciences, 83843 Moscow Id. U.S.A.
3UNCEIA, Services Techniques 13 Rue Jouet 94703 Maisons Alfort, France

Blood plasma measurements of bovine pregnancy specific protein B (bPSPB) during gestation in Alentejano beef cows were used to characterize twin pregnancies resulting from transfer of in vitro fertilized embryos (TWIN IVF; n=25, beef crosses), single pregnancies resulting from transfer of similar embryos (SING IVF; n=35, beef crosses) and single gestations resulting from artificial insemination (SING AI; n=36, pure breed), as well as late embryonic mortality associated (HS; n=10) or not (EM; n=16) to heat stress. Blood samples were collected monthly starting at 40 days of pregnancy.
Levels of bPSPB at 40 days were significantly lower in cows with EM (0.56 ± 0.18 ng/ml) and HS (0.15 ± 0.09 ng/ml) than in cows finally calving twins (3.63 ± 0.43 ng/ml) or singletons (1.87 ± 0.14 ng/ml). In 6 of 10 cows of the HS group, levels of bPSPB rose above the detection limit only at 70 days after estrus, while in the EM group only 1 of 16 cows presented the same pattern (P< 0.035). PSPB concentrations in TWIN IVF cows were significantly higher than those of SING IVF cows at 40 and 240 days of pregnancy (3.85 ± 0.30 vs. 2.04 ± 0.26 ng/ml, and 715 ± 63 vs. 415 ± 58 ng/ml, respectively; P< 0.001). The TWIN IVF group of cows presented significantly higher concentrations of bPSPB than SING AI cows at all stages of gestation, except at 180 days. In the single pregnancy groups, cows carrying fetuses originated by IVF embryos, when compared to cows carrying fetuses originated by AI, presented significantly higher concentrations of bPSPB from 100 to 210 days of pregnancy and at calving.The rate of increase in bPSPB from 40 to 240 days of gestation taken from the slope of multiplicative regressions, was significantly higher in SING IVF than in TWIN IVF and SING AI groups of cows (3.284 ± 0.085 vs. 2.750 ± 0.101 and 2.852 ± 0.086, respectively; P< 0.0001). After spontaneous calvings, calves born from the SING IVF cows were significantly heavier than those born either from SING AI and TWIN IVF cows (58 ± 3 vs. 42 ± 2 and 39 ± 2 kg, respectively; P< 0.0001). Twin gestations were 8 days shorter than single ones (P< 0.0001).
In conclusion, bPSPB measurements at 40 and 70 days of gestation are useful to diagnose embryo losses occurring later then 21 days of gestation. Heat stressed cows with embryo losses presented a retarded pattern of bPSPB production, suggesting an impaired metabolic function of the trophoblast until near 70 days of gestation. Significantly higher amounts of bPSPB are produced at 40 days in twin pregnancies. A larger variation and higher bPSPB production were observed in cows carrying crossbred fetuses derived from IVF techniques than in purebred AI'ed cows. These results suggest that there is a relationship between fetal growth rate and PSPB increase during pregnancy in cattle.

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VI Jornadas Internacionales de Reproducción Animal e IA, Salamanca, Libro de Ponencias e Mesas Redondas, p. 130 (1992)

FECUNDAÇÃO IN VITRO EM BOVINOS DE CARNE

António Eduardo Monteiro Horta
Departamento de Reprodução Animal, E.Z.N.-I.N.I.A.
Vale de Santarém, 2000 Santarém, PORTUGAL

Resumo de aspectos a discutidos em mesa redonda:

Como o seu nome indica, a fertilização in vitro é uma técnica que permite viabilizar a união dos gâmetas sexuais fora do seu meio natural (em laboratório), conseguindo assim a "produção" de um ovo fertilizado. Os oocitos e os espermatozóides utilizados deverão encontrar-se, no momento da união celular ou fecundação, perfeitamente amadurecidos. No caso dos oocitos, a maturação pode ser realizada in vivo (colheita de oocitos pós-ovulatórios por lavagem), ou in vitro (colheita de oocitos imaturos por punção de folículos terciários). Relativamente aos espermatozóides, a sua utilização só é viável após a capacitação dos mesmos, processo totalmente conseguido no laboratório. Após a fertilização ser conseguida, uma nova etapa se inicia no laboratório, tendo por objectivo a multiplicação do ovo fertilizado até à fase jovem blastocito (maturação do embrião).
No caso dos bovinos de carne, quando se pretende uma produção em larga escala de embriões totalmente produzidos in vitro (IVF/IVM), as fêmeas dadoras (vacas de carne puras ou cruzadas) são normalmente procuradas nos matadouros onde é facil obter um grande número de ovários, multiplicando-se assim a disponibilidade de oocitos a fertilizar. Estes podem ser fertilizados com sémen proveniente de raças de carne com precocidade e peso variáveis, de acordo com os objectivos a atingir na exploração que utilizará os embriões resultantes (cria/recria) e com a raça e aptidão das vacas receptoras desses mesmos embriões (vocação leite/carne).
Neste momento está em curso um projecto de investigação financiado pelo Programa ECLAIR-CEE (contrato nº AGRE 0018), em que a EZN se encontra envolvida juntamente com a Ovamass Ltd./ABC, o Trinity College Dublin, a University College Dublin, a Teagasc do Irish Department of Agriculture e o Agricultural Research Institute (Ulster/UK), onde se está a estudar a optimização da utilização de embriões bovinos IVF/IFM de raças de carne na indução de gestações gemelares e sexagem de embriões. No âmbito deste projecto os embriões são produzidos em larga escala pelo laboratório Ovamass Ltd., a partir de oocitos colhidos dos ovários de fêmeas de carne abatidas em matadouro, sendo posteriormente congelados os considerados viáveis após classificação. Durante esta mesa redonda será mostrado um filme documentando as operações de descongelação, classificação, transferência dos embriões IVF/IFM e nascimento dos produtos resultantes, utilizando fêmeas receptoras da raça Alentejana existentes na EZN.

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In: STUDIES ON THE REPRODUCTIVE EFFICIENCY OF CATTLE USING RADIOIMMUNOASSAY TECHNIQUES, Application of Radioimmunoassay to Improving the Reproductive Efficiency and Productivity of Large Ruminants, Ed. Joint FAO/IAEA Division, Vienna, pp 9-19 (1990)

STUDIES ON POST-PARTUM ANOESTRUS IN ALENTEJANO BEEF COWS

A.E.M. Horta, M.I. Vasques, R.M. Leitão and J. Robalo Silva
Departamento de Fisiologia e Reprodução Animal,
Estação Zootécnica Nacional - Instituto Nacional de Investigação Agrária,
Vale de Santarém 2000, Portugal

Post-partum ovarian activity in Alentejano beef cows maintained on natural pastures was monitored by measuring plasma progesterone levels using the radioimmunoassay method. Post-partum anoestrus was compared in cows calving in two different seasons (winter and summer). Differences between primiparous and multiparous cows, the effect of short term nursing interruption (72 hours by the 20th day pos-partum) and the dam's body weight at calving (BWC) were also considered with respect to their influence on the onset of post-partum ovarian activity.Fertility after two breeding seasons (April-May and November-December) was also studied.
Post-partum anoestrus was significantly longer in winter calving cows than in those calving in summer, in both multiparous and primiparous cows (73.9 versus 33.1 and 111.1 versus 35.6 days, respectively; P< 0.001). Primiparous cows took a significantly longer period to resume cyclicity after calving than multiparous cows during the winter calving season (P< 0.001). BWC was significantly lower during the winter season, in both multiparous and primiparous cows (565.8 versus 642.8 and 435.8 versus 577.0 kg, respectively; P< 0.001). Short term calf removal accounted for a shorter post-partum anoestrus only during the summer season (30 versus 39 days; P< 0.05). BWC and the interval between calving and 21 June (C-21J) were significantly correlated with the duration of the post-partum anoestrus (y = 162.17 - 0.222(BWC) + 0.316(C-21J); r²=0.41; P< 0.03). Because of a longer post-partum anoestrus, fertility was reduced in cows calving during the winter season compared with those calving in summer in all three years of study (63.9 versus 76.9%, 57.8 versus 62.9% and 36.5 versus 60.6%, for 1984, 1985 and 1986, respectively).
The results presented show that the winter period in Portugal impairs the return to ovarian activity post-partum in this breed. The seasonal effect seems to be associated with a decrease in food supply during winter. Temporary calf removal stimulates the onset of ovarian function only during the summer season. Primiparous cows, during the winter season, need a significantly longer time to resume cyclicity after calving than multiparous cows.

Research carried out with the support of the Instituto Nacional de Investigação Agrária (Portugal) and the International Atomic Energy Agency (Vienna), under the research contract 3259/RB

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II Simp. Inter. de Reprod. Animal, SPRA, Lisboa, 21-24 Nov., pp. 291-301 (1984)

III Simp. Inter. de Reprod. Animal, SPRA, Lisboa (1986)

International Symposium on the use of Nuclear Techniques in Studies of Animal Production and Health in Different Environments, IAEA-SM-292/5P: 93, Vienna - Austria (1986)

XXIII World Veterinary Congress, Montreal - Canada, p. 118 (1987)

XXXVIII Annual Meeting of the EAAP, Lisboa. Vol. II, p. 730 (1987)

XXXVIII Annual Meeting of the EAAP, Lisboa. Vol. II, p. 918 (1987)

5º SIMP. INTER. DE REPROD. ANIMAL, Luso, Portugal, II Vol., pp. 125-131. (1993)

V Jornadas Internacionales en Reproducción Animal e I.A. (Ponencias y comunicaciones no incluidas n los tomos I y II), Asociación Española de Especialistas en Reproducción Animal, Inseminación Artificial e Nuevas Tecnologias, Zaragoza - Espanha, pp. 51-69 (1990)

Anim. Reprod. Sci., 38(4): 279-289 (1995)

VI Jornadas Internacionales de Reproducción Animal e IA, Salamanca, Libro de Ponencias e Mesas Redondas, p. 130 (1992)

In: STUDIES ON THE REPRODUCTIVE EFFICIENCY OF CATTLE USING RADIOIMMUNOASSAY TECHNIQUES, Application of Radioimmunoassay to Improving the Reproductive Efficiency and Productivity of Large Ruminants, Ed. Joint FAO/IAEA Division, Vienna, pp 9-19 (1990)